国产黄色av-爱爱视频网-91久久视频-亚洲视频网-在线国产小视频-日韩69-久久成人在线视频-www.youjizz日本-精品国产视频-台湾swag在线观看-乱h伦h女h在线视频-福利一区在线-三年中文在线观看中文版-在线观看高清av-国产精品视频久久久久久-亚欧精品在线观看-日中文字幕-精品乱码一区二区三区-包射屋-熟女少妇精品一区二区-思思九九热-欧美绿帽合集xxxxx-国产69久久久欧美一级-91精品综合久久久久久-日本精品一区视频

新聞中心

News Center

當前位置:首頁新聞中心利用血清篩選噬菌體文庫PCR擴增的模板

利用血清篩選噬菌體文庫PCR擴增的模板

更新時間:2013-03-16點擊次數:1711

[方法]
1.用無菌塑料吸嘴挑取一個AmpR噬菌粒菌落(直徑大約lmm)并將其轉入到0.2ml MicroAmp反應管中, 內含20u1洗脫緩沖液。在GeneAmp9600 PCR儀中,95℃加熱樣本10分鐘(避免用離心澄清,因為加熱可使細胞碎片黏附在管底)。
2.將菌落提取物作為該克隆的主拷貝保存。另外,這些菌落也可以直接轉移到PCR反應體系中,并在PCR程序中插入加熱步驟。此時,可將克隆主拷貝穿刺接種到在用UV滅菌并鋪有LB—瓊脂培養基+Amp的微板孔中。
3.配置PCR反應體系:將3ul菌落提取物加入到一個0.2ml MicroAmpTM反應管中;反應管包含150nmol/L正鏈引物和反鏈引物、50mmol/L dNTP、0.5%NP-40、Taq緩沖液和1ul AmpllTag DNA聚合酶,終體積為50ul。按以下程序運行PCR反應:94℃10秒、60℃10秒、72℃10秒,共循環30次。
4.在SilentMonitor膜底微板的各孔中,裝入Sephacril“S-300的水性懸液,使每孔中含有400ul穩定床體積介質。用真空過濾器在板底形成真空狀態,
5.吸取各個克隆PCR擴增產物并加入到含有已抽干的Sephacril孔中。真空抽吸收集96孔板中的濾液(PCR擴增模板的大小決定了采用何種凝膠過濾介質:我們發現,Sephacril S-300對分離我們的300bpPCR擴增片段效果*。按照上述流程,無論樣本的處理或收集均比使用商業供應的裝入微量離心管的旋轉柱更加容易和快速,還節省材料成本)。
6.用已純化的PCR產物,按照標準實驗方案進行測序。

www.histay.cn

主站蜘蛛池模板: 欧美精品第一页 | 欧美亚洲一区二区三区 | 在线成人免费视频 | 久久久精品国产 | 黄色网炮| 麻豆短视频 | 天天干天天爽 | 美女激情av | 欧美黑人猛交 | 大地资源二中文在线播放免费观看新剧 | 韩日av| a在线视频 | 亚洲理论片 | 黄色网址在线免费观看 | 天天爽天天干 | 精品欧美一区二区三区 | 97在线免费观看 | 久久露脸国语精品国产91 | 夜夜艹| 精品综合 | 日韩欧美在线观看视频 | 国产三级在线播放 | 国内久久| 欧美xxxxxxxxx| www.久久久| 高清一区二区三区 | 青青草av | 日本天堂在线 | 国产免费看 | 欧美精品久久久久久久多人混战 | 免费一级黄色片 | 岛国av在线 | 天天色天天色 | 天天想你在线观看完整版电影高清 | 日批在线观看 | 成人在线免费视频 | 精品国产一区二区三区久久久蜜月 | 欧洲一区二区 | av在线免费播放 | xxx综合网| 免费在线观看视频 | 日韩免费av | gogo人体做爰大胆视频 | 成人激情视频在线观看 | 麻豆网站在线观看 | 一极毛片| 日韩欧美精品 | 久久美女视频 | 毛片毛片毛片 | 牲欲强的熟妇农村老妇女视频 | 视频在线观看网站免费 | 一区二区视频在线观看 | 日韩黄色网址 | 性生活视频网站 | 午夜大片 | 国产精品激情 | 日本做爰三级床戏 | 三级在线观看 | 少妇av| 娇妻被老王脔到高潮失禁视频 | 欧美性xxxxx| 国产视频一区二区在线观看 | 少妇高潮视频 | 精品视频一区二区 | 亚洲乱码一区二区 | 在线一区 | 精品人妻一区二区三区日产 | 中文字幕在线观看网站 | 国产福利小视频 | 日韩久久精品 | 国产无遮挡又黄又爽免费网站 | 亚洲午夜精品久久久久久app | 四虎影视www在线播放 | 黄色av免费看 | 91玉足脚交嫩脚丫在线播放 | 国产免费无码一区二区 | 日韩欧美视频 | 香蕉视频网站 | 一区二区三区在线观看视频 | 亲嘴脱内衣内裤 | av网址在线 | 天天干天天操天天射 | 五月天综合网 | 黄色av网站在线观看 | 91在线视频| 中文字幕av久久爽一区 | 狠狠躁| www.操| 久久久毛片 | 天天干天天操天天射 | 国语对白 | 成人在线网址 | 亚洲精品成人 | 国产精品无码AV | 丰满少妇xoxoxo视频 | 久草视频在线播放 | 麻豆精品久久久久久久99蜜桃 | 丰满人妻一区二区三区免费 | 久久88 |